Effects of 970 nm diode laser irradiation on morphology, proliferation, and differentiation of gingival mesenchymal stem cells / Efectos de la irradiación con láser de diodo de 970 m sobre la morfología, la proliferación y la diferenciación de las células madre mesenquimales gingivales

Objective: The objective of this study was to investigate the morphology, proliferation, and differentiation of gingival mesenchymal stem cells (GMSCs) irradiated with a 970 nm Diode Laser (LLLT). It is essential to validate the efficacy of treatment, optimize irradiation conditions and guarantee the safety and quality of stem cells for future use in dental applications. Materials and Methods: GMSCs were cultured in standard conditions and irradiated with a Diode laser (970 nm, 0.5W) with an energy density of 9J/cm2. Cell proliferation was assessed with the WST-1 proliferation kit. GMSCs were differentiated into chondrogenic and osteogenic lineages. Cell morphology was performed with Hematoxylin/eosin staining, and quantitative nuclear analysis was done. Cell viability was monitored with trypan blue testing. Results: GMSCs subjected to irradiation demonstrated a significant increase in proliferation at 72 hours compared to the non-irradiated controls (p=0.027). This indicates that the 970 nm diode laser has a stimulatory effect on the proliferation of GMSCs. LLLT-stimulated GMSCs exhibited the ability to differentiate into chondrogenic and osteogenic lineages. A substantial decrease in cell viability was observed 24 hours after irradiation (p=0.024). However, after 48 hours, the cell viability recovered without any significant differences. This indicates that there might be a temporary negative impact on cell viability immediately following irradiation, but the cells were able to recover and regain their viability over time. Conclusions: This study support that irradiation with a 970 nm diode laser could stimulate the proliferation of GMSCs, maintain their ability to differentiate into chondrogenic and osteogenic lineages, and has minimal impact on the mor- phological characteristics of the cells. These results support the potential use of NIR Lasers in combination with GMSCs as a promising strategy for dental treatments.

Objetivo: El objetivo de este estudio fue investigar la morfología, proliferación y diferenciación de las células madre mesenquimatosas (GMSC) irradiadas con un láser de diodo de 970 nm (LLLT). Es fundamental validar la eficacia del tratamiento, optimizar las condiciones de irradiación y garantizar la seguridad y calidad de las células madre para su uso futuro en aplicaciones dentales.Materiales y Métodos: Las GMSC se cultivaron en condiciones estándar y se irradiaron con un láser de diodo (970 nm, 0,5 W) con una densidad de energía de 9 J/cm2. La proliferación celular se evaluó con el kit de proliferación WST-1. Las GMSC se diferenciaron en linajes condrogénicos y osteogénicos. La morfología celular se realizó con tinción de hematoxilina/eosina y se realizó un análisis nuclear cuantitativo. La viabilidad celular se controló con prueba de azul de tripano. Resultados: Las GMSC sometidas a irradiación demostraron un aumento significativo en la proliferación a las 72 horas en comparación con los controles no irradiados (p=0,027). Esto indica que el láser de diodo de 970 nm tiene un efecto estimulante sobre la proliferación de GMSC. Las GMSC estimuladas con LLLT exhibieron la capacidad de diferenciarse en linajes condrogénicos y osteogénicos. Se observó una disminución sustancial de la viabilidad celular 24 horas después de la irradiación (p=0,024). Sin embargo, después de 48 horas, la viabilidad celular se recuperó sin diferencias significativas. Esto indica que podría haber un impacto negativo temporal en la viabilidad de las células inmediatamente después de la irradiación, pero las células pudieron recuperarse y recuperar su viabilidad con el tiempo. Conclusión: En conclusión, este estudio respalda que la irradiación con un láser de diodo de 970 nm podría estimular la proliferación de GMSC, mantener su capacidad para diferenciarse en linajes condrogénicos y osteogénicos y tiene un impacto mínimo en las características morfológicas de las células. Estos resultados respaldan el uso potencial de láseres NIR en combinación con GMSC como una estrategia prometedora para tratamientos dentales.

Agrandamiento gingival asociado al tratamiento de ortodoncia: análisis histológico e inmunohistoquímico de dos casos clínicos

El agrandamiento gingival asociado al tratamiento de ortodoncia (AGTO) es el crecimiento no controlado de la encía. Aquí reportamos dos casos clínicos de pacientes masculinos sistèmicamente sanos con AGTO generalizado, con asociación a la biopelícula dental y sin esta. En ambos pacientes se identificó un tejido epitelial hiperplásico con abundantes células positivas para Ki-67 y tejido conectivo rico en fibras de colágeno distribuidas aleatoriamente. Futuros estudios serán útiles para dilucidar las diferencias fisiopatológicas del AGTO con relación con el biofilm dental y sin esta.

Orthodontic treatment-induce gingival overgrowth (OTGO) is uncontrolled growth of the gingiva. Here, we report two clinical cases of systemically healthy male patients with generalized GH undergoing orthodontic treatment, with and without association with dental biofilm. In both patients, hyperplastic epithelial tissue was identified with abundant Ki-67 positive cells and connective tissue rich in randomly distributed collagen fibers. Future studies will be useful to elucidate the pathophysiological differences of OTGO with and without relation to dental biofilm.

La expresión del Ki67 y su correlación con factores pronósticos clásicos del carcinoma mamario

Introducción: El Ki67 es una proteína reguladora del ciclo celular asociada a la proliferación de las células tumorales. Su expresión siempre ha tenido un papel en la clasificación tumoral, constituye uno de los factores pronósticos y predictivos en el carcinoma mamario. Objetivo: Determinar la relación entre la expresión del marcador de Ki67 y otros factores pronósticos clásicos del cáncer de mama. Métodos: Se realizó un estudio descriptivo analítico, de corte transversal, realizado en el Hospital Clínico-Quirúrgico Docente Celestino Hernández, Villa Clara, entre enero 2017 y mayo de 2019. Se incluyeron 286 mujeres con diagnóstico de carcinoma de mama infiltrante, a cuyas biopsias se les realizó estudio inmunohistoquímico. La expresión del marcador celular Ki67 fue categorizado como baja (Ki6720 %). Se analizó la relación entre el nivel de expresión de Ki67 con otros factores pronósticos y predictivos del carcinoma mamario. Resultados: El tipo histológico no especial (carcinoma ductal) fue el que se reportó con mayor frecuencia. Los niveles de expresión altos del marcador celular Ki67 (Ki67≥20 %) se asociaron con el grado histológico alto (grado 3) y la sobreexpresión de Her2. La expresión baja del Ki-67 (<20 %) se asoció con la expresión de los receptores de estrógeno y progesterona. No se demostró asociación significativa entre la talla tumoral y la expresión de Ki67. Conclusiones: Los niveles de expresión del Ki67 mostraron una asociación significativa con varios factores predictivos y pronósticos clásicos del cáncer de mama.

Introduction: Ki67 is a regulatory protein of cellular cycle which is associated to the proliferation of tumoral cells. Its expression has always had an important role at the tumor classification and it is one of the prognostic and predictive factors in breast carcinoma. Objective: To determine the relationship between the expression of Ki67 and other classic prognostic factors used in breast cancer. Methods: A cross-sectional, analytic and descriptive study was carried out at the Teaching Clinic-Surgical Hospital Celestino Hernández, Villa Clara, from January 2017 to June 2019. It was included 286 women with diagnosis of infiltrating breast carcinoma, whose biopsies were studied by immunohistochemistry. The Ki-67 cell marker expression was categorized as low (Ki-6720 %). It was analyzed the relationship between level of expression of Ki67 and other classical prognostic and predictive factors. Results: The no special histological type (ductal carcinoma) was the type more often reported. High expression level of Ki67 was associated with the high histological grade (grade 3) and the overexpression of Her2. Low expression of Ki-67 (<20 %) was associated with the expression of estrogen and progesterone receptors. There was not significant association between the tumor size and the expression of Ki67. Conclusions: The levels of expression of Ki67 showed significant association with several predictive and prognostic factors of breast carcinoma.

Biological and physico-mechanical properties of poly (methyl methacrylate) enriched with graphene oxide as a potential biomaterial / Propiedades físicas-mecánicas-biológicas del poli (metilmetacrilato) enriquecido con óxido de grafeno como potencial biomaterial

Objective: To determine the cytotoxicity and effects of graphene oxide (GO) on cellular proliferation of gingival-fibroblasts, pulp-dental cells and human osteoblasts in culture, and to determine the physical, mechanical and biological properties of poly (methyl methacrylate) (PMMA) enriched with GO. Material and Methods: The GO was characterized with SEM. Cytotoxicity and cell proliferation were determined by the MTT bioassay. The physical mechanical tests (flexural strength and elastic modulus) were carried out with a universal testing machine. Sorption and solubility were determined by weighing before and after drying and immersion in water. Porosity was evaluated by visual inspection. Data were analyzed with Student's t-test and Tukey's posthoc ANOVA. Results: The GO has a heterogeneous morphology and a particle size of 66.67±64.76 µm. GO has a slight to no-cytotoxicity (>50-75% viability) at 1-30 days, and at 24 hours incubation of PMMA with GO significantly stimulates osteoblasts (45±8%, p<0.01). The physical and mechanical properties of PMMA with GO increase considerably without altering sorption, solubility and porosity. Conclusion: GO alone or with PMMA has an acceptable biocompatibility, could contribute to cell proliferation, cell regeneration and improve the physical mechanical properties of PMMA.

Objective: To determine the cytotoxicity and effects of graphene oxide (GO) on cellular proliferation of gingival-fibroblasts, pulpdental cells and human osteoblasts in culture, and to determine the physical, mechanical and biological properties of poly (methyl methacrylate) (PMMA) enriched with GO. Material and Methods: T he G O w as c haracterized with SEM. Cytotoxicity and cell proliferation were determined by the MTT bioassay. The physical-mechanical tests (flexural strength and elastic modulus) were carried out with a universal testing machine. Sorption and solubility were determined by weighing before and after drying and immersion in water. Porosity was evaluated by visual inspection. Data were analyzed with Student's t-test and Tukey's post-hoc ANOVA. Results: The GO has a heterogeneous morphology and a particle size of 66.67±64.76 ?m. GO has a slight to no-cytotoxicity (>50-75% viability) at 1-30 days, and at 24 hours incubation of PMMA with GO significantly stimulates osteoblasts (45±8%, p<0.01). The physical and mechanical properties of PMMA with GO increase considerably without altering sorption, solubility and porosity. Conclusion: GO alone or with PMMA has an acceptable biocompatibility, could contribute to cell proliferation, cell regeneration and improve the physical-mechanical properties of PMMA.

Supervivencia de células fibroblásticas humanas en ausencia de suplementación / Survival of Human Fibroblastic Cells in the Absence of Supplementation

Resumen Introducción. Los fibroblastos gingivales (FGs) son células del tejido conjuntivo gingival que han tomado en los últimos años una relevancia promisoria por su probable utilización en la terapia celular, dadas sus capacidades de multipotencialidad y de autorrenovación. Objetivo. Conocer y describir el impacto de la ausencia en la suplementación de Suero Fetal Bovino (SFB) en la supervivencia de fibroblastos gingivales en cultivos. Materiales y métodos. Fibroblastos gingivales fueron aislados de tejido gingival de pacientes sanos y cultivados en medios de cultivos DMEM (Dulbecco's Modified of Eagle Medium) en ausencia y suplementados con 0.2% de SFB a 37°C en una atmósfera húmeda con 5% de CO2. Se llevó a cabo una evaluación morfológica, de supervivencia y proliferación de los FGs, así como la identificación mediante la técnica de inmunofluorescencia de marcadores del citoesqueleto celular como la actina y mitocondrias. Resultados. Los FGs cultivados en ausencia y con suplementación de 0.2% de SFB evidenciaron una forma fusiforme, con núcleos ovalados y numerosas prolongaciones citoplasmáticas durante el tiempo de cultivo. Un leve aumento en la proliferación de FGs fue observado en aquellas células en contacto con el medio DMEM+0.2% de SFB comparadas con el medio donde estuvo ausente la suplementación. El inmunomarcaje de la actina y las mitocondrias dejó en evidencia que la ausencia y suplementación a 0.2% de SFB no afectó su localización en los FGs evaluados. Conclusión. Los fibroblastos gingivales sobreviven y proliferan en ausencia de SFB, conservando sus características morfológicas celulares.

Abstract Introduction. Gingival fibroblasts (GF) are cells of gingival connective tissue that have taken promising relevance in recent years due to their probable use in cell therapy, given their multipotencial and self-renewal capabilities. Objective. To know and to describe the impact of the absence of Fetal Bovine Serum (FBS supplementation on the survival of gingival fibroblasts in cultures. Materials and methods. Gingival fibroblasts were isolated from gingival tissue of healthy patients and cultured in DMEM (Dulbecco's Modified of Eagle Medium) culture media in absence and supplemented with 0.2% FBS at 37 ° C in a humid atmosphere with 5% CO2. A morphological evaluation, survival and proliferation of GF were carried out, as well as the identification by the immunofluorescence technique of cellular cytoskeleton markers such as actin and mitochondria. Results. The GF grown in the absence and with supplementation of 0.2% FBS showed a fusiform shape, with oval nuclei and numerous cytoplasmic extensions during the culture time. A slight increase in the proliferation of GF was observed in those cells in contact with the DMEM medium +0.2% FBS compared to the medium where the supplementation was absent. Immunostaining of actin and mitochondria showed that the absence and supplementation to 0.2% of FBS did not affect its location in the evaluated. Conclusion. Gingival fibroblasts survive and proliferate in the absence of FBS, preserving their cellular morphological characteristics.

Señuelo dirigido a HIF-1 potencializa efectos citotóxicos de dos agentes quimioterapéuticos en MDA-MB-231 / HIF decoy improve cytotoxic effects of two chemotherapeutic agents on MDA-MB-231

RESUMEN Procesos oncogénicos como proliferación incontrolable, resistencia apoptótica, aumento de mecanismos angiogénicos y evasión inmune son regulados generalmente por factores de transcripción, como HIF-1. Por tanto, se ha señalado a esta molécula como un blanco terapéutico prometedor. Para explorar esta posibilidad, un oligonucleótido tipo "señuelo" dirigido a HIF-1 a (ODN) fue diseñado para evaluar su eficiencia en esquema tanto monoterapéutico, como en combinación con dos agentes quimioterapéuticos en un modelo in vitro de cáncer de mama. Después de comprobar, mediante citometría de flujo e inmunofluorescencia, la localización del blanco, el señuelo fue transfectado en la línea celular MDA-MB-231. Se estableció la IC-50 de HIF-1 a ODN, Cisplatino y Taxol con el método de Resazurina. Mecanismos de muerte celular fueron evaluados con el método de TUNEL. Por último, se estableció el índice de combinación (IC) de cada uno de los quimio-agentes en combinación con el ODN. Se evidencio que HIF-1 a ODN causa un efecto citotóxico en MDA-MB-231 de hasta un 90% hacia las 72h pos-tratamiento. Este efecto no se observa tanto en los controles del ensayo, como en el cultivo primario de células no tumorales (FIBRO), siendo este agente altamente selectivo hacia células tumorales, al activar mecanismos pro-apoptóticos. A su vez, HIF-1 a ODN potencializa la actividad tumorogénica de Cisplatino y Taxol en la línea celular tumoral. Por tanto, HIF-1 a ODN demostró tener actividad selectiva potencialmente antitumoral, al disminuir la proliferación celular e inducir apoptosis; optimizando de forma sinérgica, la eficacia de fármacos quimioterapéuticos de alto espectro, en tratamientos combinados.

ABSTRACT Oncogenic processes like uncontrollable proliferation, resistance to apoptosis, increases in angiogenic mechanisms and immune evasion are regulated by transcription factors such HIF-1. Therefore, this molecule is regarded as a potential therapeutic target. To explore this possibility, a HIF-1 α oligonucleotide decoy (ODN) was designed to evaluate its efficiency on both a mono-therapeutic scheme and a mixed treatment with two chemotherapeutic agents within an in vitro model of breast cancer. After confirming the target location with flow cytometry and immunofluorescence assays, that decoy was transfected over the MDA-MB-231 cell line. We established the HIF-1 α ODN, Cisplatin and Taxol IC-50 using Resazurin tests. Cell death mechanisms was evaluated with TUNEL. Finally, we obtained the combination index (IC) of each chemical agents with the ODN. This study showed that HIF-1 α ODN caused a cytotoxic effect (up to 90%) in MDA-MB-231 during 72 hours post treatment. That effect did not appear in either the assay controls nor in non-tumor cell cultures (FIBRO). This agent is highly selective towards tumor cells, activating pro-apoptotic mechanisms. Additionally, HIF-1 α ODN increases the tumorigenic action of Cisplatin and Taxol on the cell line, due to an additive effect. For these reasons, HIF-1 α ODN has potential antitumor selective activity, decreasing cell proliferation, inducing apoptosis, and optimizing, in a synergistic manner, the efficacy of wide spectrum chemotherapeutic compounds when it used in a combined treatment.

Efecto de la ausencia de suero fetal bovino sobre la morfología y organelas de células fibroblásticas / Effect of the absence of fetal bovine serum on the morphology and organelles of fibroblast cells

RESUMEN Los fibroblastos son células constituyentes de los tejidos conectivo. Los fibroblastos gingivales (FGs), células responsables de la síntesis de la matriz extracelular (MEC) en el tejido conectivo gingival, participan en la regulación de los procesos de cicatrización y de reparación de la encía. Debido a su potencial regenerativo, los FGs podrían ser células capaces de contribuir a mejorar los procesos de cicatrización, a nivel local y sistémico e, incluso, ser utilizadas como un modelo celular útil en la comprensión de los aspectos fisiopatológicos de la cavidad oral. El objetivo del presente trabajo fue describir el impacto de la concentración del suero fetal bovino (SFB), en la supervivencia, el crecimiento y la expresión de marcadores celulares en los FGs. Cultivos celulares de FGs fueron realizados durante 7 días, utilizando medio de cultivo DMEM (Dulbecco's Modified Eagle's médium), en ausencia y presencia de 10% de SFB. Análisis morfológicos e inmunohistoquímicos de la actina, mitocondrias, lisosomas y retículo endoplasmático (RE) fueron usados para evaluar el impacto de la concentración del SFB sobre los FGs. Los resultados indican que los FGs cultivados en presencia de 10% de SFB tuvieron una tasa de crecimiento más elevada en comparación con los FGs, cultivados en ausencia de SFB. El marcaje de los elementos celulares indica la ausencia de alteraciones en las organelas celulares de los FGs, cuando son cultivados en ausencia de SFB. En conclusión, los FGs son capaces de sobrevivir, proliferar y conservar sus características morfológicas, cuando son cultivados en presencia y ausencia de SFB.

ABSTRACT Fibroblasts are constituent cells of connective tissues. Gingival fibroblasts (GFs), cells responsible for the synthesis of the extracellular matrix (ECM) in the gingival connective tissue, participate in the regulation of healing and repair processes of the gingiva. Due to their regenerative potential, GFs could be cells capable of contributing to improve the healing processes at the local and systemic level and even be used as a useful cellular model in understanding of the physiopathological aspects of the oral cavity. The aim of the present work was to describe the impact of the concentration of fetal bovine serum (FBS) on the survival, growth and expression of cell markers in GFs. Cell cultures of GFs were performed for 7 days using DMEM culture medium (Dulbecco's Modified Eagle's medium) in the absence and presence of 10% FBS. Morphological and immunohistochemistry analyzes of actin, mitochondria, lysosomes and endoplasmic reticulum (ER) were used to evaluate the impact of FBS concentration on GFs. The results indicate that GFs cultured in the presence of 10% FBS had a higher growth rate compared to GFs cultured in the absence of FBS. The marking of the cellular elements indicates the absence of alterations in the cellular organelles of the GFs when they are cultured in the absence of FBS. In conclusion, GFs are capable to surviving, proliferating and conserving their morphological characteristics when they are cultured in the presence and absence of FBS.

Terapia de presión negativa como tratamiento alternativo en el manejo de una úlcera vascular arterial de miembros inferiores / Negative- pressure therapy as an alternative treatment for managing arterial vascular ulcer of the lower limbs

Resumen Objetivo: Reportar un caso sobre el uso de la terapia de presión negativa como tratamiento alternativo en el manejo de una úlcera vascular arterial de miembros inferiores. Métodos: Por medio de la historia clínica, se revisó los registros previos de una paciente en un centro de atención médica de tercer nivel en Popayán, Colombia. Posteriormente, se realizó una revisión sistemática bibliográfica a través de las bases de datos de Pubmed, ScienceDirect y Scielo. Resultados: La terapia de presión negativa favoreció el proceso de cicatrización, permitiendo el cierre de la herida. Conclusiones: Actualmente, este sistema se considera un apoyo fundamental en el tratamiento de las heridas complejas, las cuales suponen un reto terapéutico importante.

Abstract Objective: To report a case about the use of the Negative-pressure wound therapy as an alternative treatment for arterial vascular ulcers presented in the lower limbs. Methods: The patient's records were reviewed based on her medical history in a tertiary referral care center in Popayan, Colombia. Subsequently, a systematic literature review was conducted through the Pubmed database, ScienceDirect, and Scielo. Results: The use of Negative-pressure wound therapy favored the lesion healing process. Conclusions: Nowadays, this system is considered as an essential treatment for complex wounds, which represent a major therapeutic challenge.

Cirugía laparoscópica preservadora de la fertilidad en tumores limítrofes del ovario: reporte de un caso / Laparoscopic fertility-preserving surgery in borderline ovarian tumors. A case report

Resumen ANTECEDENTES: Los tumores limítrofes del ovario se caracterizan por la proliferación celular y atipia nuclear, sin invasión estromal. Su incidencia se estima en 2.5 a 5.5 por cada 100,000 mujeres-año. Casi siempre se diagnostican en etapas tempranas, con buen pronóstico, incluso también en estadios avanzados. CASO CLÍNICO: Paciente de 25 años de edad, con crecimiento abdominal y dolor difuso, útero aumentado de volumen por arriba de la cicatriz umbilical, con tumoración sólida, móvil, al tacto vaginal dependiente del anexo derecho. Reporte de ultrasonido: ovario derecho 13.1 x 12 x 11.2 cm y el izquierdo no visible, CA 125: 130.4 U/mL. Se le efectuó un lavado peritoneal, se tomó una biopsia peritoneal y se practicaron: omentectomía y salpingooferectomía derecha. El estudio transoperatorio reportó la existencia de una tumoración en el ovario derecho, con implantes en la cavidad abdominal. Reporte histopatológico: tumor papilar limítrofe del ovario derecho, sin invasión vascular, lavado peritoneal, epiplón e implantes peritoneales positivos a células neoplásicas. Se indicó tratamiento coadyuvante con quimioterapia (plaquitaxel y carboplatino) y logró quedar embarazada un año después de terminar ese esquema; el embarazo concluyó en parto y nacimiento de una niña de 3100 g. CONCLUSIÓN: Este caso refleja el éxito de la cirugía laparoscópica en el tratamiento de los tumores limítrofes serosos, con cirugía preservadora de la fertilidad. Quedan claras las ventajas de la quimioterapia como tratamiento coadyuvante en este tipo de tumores.

Abstract BACKGROUND: Borderline ovarian tumors are defined as the presence of cell proliferation and nuclear atypia without stromal invasion2, their incidence is estimated between 2.5 and 5.5 / 100,000 women per year, they are usually diagnosed in early stages with a good prognosis even in advanced stages. CLINICAL CASE: 25-year-old patient, with abdominal growth and diffuse pain, increased uterus of volume above the umbilical scar, with solid, mobile tumor, to the vaginal touch dependent on the right annex. Ultrasound report: right ovary 13.1 x 12 x 11.2 cm and the left not visible, CA 125: 130.4 U / mL. A peritoneal lavage was performed, a peritoneal biopsy was taken, and omentectomy and right salpingopherectomy were performed. The transoperative study reported the existence of a tumor in the right ovary, with implants in the abdominal cavity. Histopathological report: papillary tumor bordering the right ovary, without vascular invasion, peritoneal lavage, omentum and positive peritoneal implants to neoplastic cells. Adjuvant treatment with chemotherapy (Plaquitaxel and Carboplatin) was indicated and she managed to get pregnant a year after finishing that scheme; the pregnancy concluded in childbirth and birth of a girl of 3100 g. CONCLUSION: This case reflects the success of laparoscopic surgery in the management of serous border tumors with fertility-preserving surgery, in addition to highlighting the use of chemotherapy as an adjuvant treatment in this type of pathologies.

Anticancer drug screening: standardization of in vitro wound healing assay / Triagem de drogas anticâncer: padronização do ensaio de ranhura in vitro

ABSTRACT Introduction: Gliomas are characterized by rapid proliferation and aggressive invasion into normal surrounding brain tissue. In medical laboratories, the in vitro wound healing assay stands out as a simple, easy, inexpensive and affordable method to evaluate cell migration and proliferation. Objective: To standardize the in vitro wound healing assay using antimicrotubule drugs as positive controls. Methods: U87MG glioma cells were seeded at different densities and, after 24 h, the monolayer was scratched using different micropipette tip size to create a gap with no cells. The cells were then treated with colchicine and paclitaxel in culture medium with the presence or absence of fetal bovine serum. The wound was photographed with the aid of an inverted microscope and the wound area was measured using the Image J software. Results: Better defined edges scratches and monolayer with approximately 90% confluence were obtained at 1.5 and 2 x 105 cells/well density. The width and area of the scratch were, respectively, 948 pm/2.193221 mm2; 964 pm/2.266 mm2 and 1448 pm/3.221 mm2 to 10. 200 and 1000 pl micropipette tips. Colchicine inhibited wound closure by 12.6% or 3.4%, both in the presence or absence of serum; paclitaxel 2.4 and 6.7% respectively. Conclusion: Under standardized conditions, colchicine and paclitaxel proved to be efficient positive controls into the in vitro wound healing assay.

RESUMEN Introducción: Gliomas se caracterizan por rápida proliferación e invasion agresiva del tejido cerebral normal circundante. En laboratorios médicos, el ensayo de cierre de herida - una prueba in vitro - se destaca por ser un método simple, fácil, de bajo costo y accesiblepara evaluar la migración y la proliferación celular. Objetivo: Estandarizar el ensayo de cierre de herida usando agentes anti-microtúbulos como control positivo. Métodos: Las células de glioma U87MG fueron sembradas en diferentes concentracionesy, después de 24 horas, la monocamadafue rayada con punteras de diferentes tamanos para crear una hendidura sin células. Las células fueron entonces tratadas con colchicina y paclitaxel, en medio con o sin suero fetal bovino. La ranura fue fotografiada con la ayuda de un microscopio invertido, y el área de la ranura fue medida mediante el programa Image J. Resultados: Ranuras con bordes más bien-definidos y monocamada con alrededor de 90% de confluencia se obtuvieron con 1,5 y 2 x 105 células/pozo. La anchura y el área de las ranuras obtenidas fueron, respectivamente, 948 p.m/2,193 mm2; 964p.m/2,266mm2; y 1448p.m/3,221 mm2 para las punteras de 10,200y 1000pl. La colchicina inhibió el cierre de las ranuras en 12,6% o 2,4%, tanto en presencia como en ausencia de suero; el paclitaxel, 3,4% y 6,7%, respectivamente. Conclusión: En condiciones estandarizadas, colchicina y paclitaxel pueden ser usados como control positivo en el ensayo de cierre de herida in vitro.

RESUMO Introdução: Gliomas são caracterizados por terem rápida proliferação e invasão agressiva no tecido cerebral circundante normal. Em laboratórios médicos, o ensaio de ranhura - um teste in vitro - destaca-se por ser um método simples, fácil, barato e acessível para avaliar a migração e a proliferação celular. Objetivo: Padronizar o ensaio de ranhura, utilizando drogas antimicrotúbulos como controles positivos. Métodos: As células de glioma U87MG foram semeadas em diferentes concentrações e, após 24 horas, a monocamada foi arranhada usando ponteiras de diferentes tamanhos para criar uma fenda sem células. As células foram então tratadas com colchicina e paclitaxel, com meio em ausência ou presença de soro fetal bovino. A ranhura foi fotografada com auxílio de microscópio invertido, e a área da ranhura foi medida por meio do programa Image J. Resultados: Ranhuras com bordas mais bem definidas e monocamada com aproximadamente 90% de confluência foram obtidas com 1,5 e 2 x 105 células/poço. A largura e a área das ranhuras obtidasforam, respectivamente, 948pm/2,193 mm2;964pm/2,266mm2; e 1448 pm/3,221 mm2 para as ponteiras de 10, 200 e 1000 pl. A colchicina inibiu o fechamento das ranhuras em 12,6% ou 2,4%, tanto na presença quanto na ausência de soro; o paclitaxel, em 3,4% e 6,7%, respectivamente. Conclusão: Em condições padronizadas, colchicina e paclitaxel podem ser usados como controles positivos eficientes no teste in vitro de ranhura.

The role of diffusion-weighted mri of patients with spine metastases / O papel da rm ponderada por difusão de pacientes com metástases da coluna vertebral / El papel de la rm ponderada por difusión de pacientes con metástasis de la columna vertebral

ABSTRACT Objective: The role of diffusion-weighted MRI in differential diagnostics and predicting the survival of patients with spine metastases was studied. Methods: The study included data from MRI and morphological studies of 23 patients with spine metastases. Results: The values obtained for the apparent diffusion coefficient (ADC) of tumors were compared with their histological type, cell density and Ki-67 proliferation index. The effect of ADC values on overall patient survival was also assessed. A reliable inverse correlation was established between ADC values and Ki-67 proliferation index for various types of spine metastases (r=-0.753, p=0.017). The dependence of ADC values and overall survival of patients with metastases in the spine is shown. Conclusion: The technique of diffusion-weighted MRI can be used as part of a comprehensive assessment in the preoperative planning of surgical treatment, and as a prognostic factor of overall survival for this group of patients. Level of Evidence II. Prognostic retrospective study,

RESUMO Objetivos: O papel da RM ponderada por difusão nos diagnósticos diferenciais e na previsão da sobrevida dos pacientes com metástases da coluna vertebral foram analisados. Métodos: O estudo incluiu dados da RM e estudos morfológicos de 23 pacientes com metástases da coluna vertebral. Resultados: Os valores obtidos para o coeficiente de difusão aparente (ADC) dos tumores foram comparados com seu tipo histológico, densidade celular e índice de proliferação Ki-67. Além disso, avaliou-se o efeito dos valores de ADC na sobrevida global dos pacientes. Foi estabelecida uma correlação inversa confiável entre os valores de ADC e o índice de proliferação Ki-67 para diversos tipos de metástases da coluna vertebral (r =-0,753, p=0,017). A dependência dos valores de ADC e a sobrevida global dos pacientes com metástases na coluna vertebral é demostrada. Conclusão: A técnica da RM ponderada por difusão pode ser utilizada como parte de uma avaliação abrangente do planejamento pré-operatório do tratamento cirúrgico e como fator prognóstico da sobrevida global para esse grupo de pacientes. Nível de Evidência II. Estudo retrospectivo prognóstico.

RESUMEN Objetivos: Fueron analizados el papel de la RM ponderada por difusión en los diagnósticos diferenciales y en la previsión de la sobrevida de los pacientes con metástasis de la columna vertebral. Métodos: El estudio incluyó datos de RM y estudios morfológicos de 23 pacientes con metástasis de la columna vertebral. Resultados: Los valores obtenidos para el coeficiente de difusión aparente (ADC) de los tumores se compararon con su tipo histológico, densidad celular e índice de proliferación Ki-67. Además, se evaluó el efecto de los valores de ADC en la sobrevida global de los pacientes. Se estableció una correlación inversa confiable entre los valores de ADC y el índice de proliferación Ki-67 para diversos tipos de metástasis de la columna vertebral (r =-0,753, p=0,017). Es demostrada la dependencia de los valores de ADC y la sobrevida global de los pacientes con metástasis en la columna vertebral. Conclusión: La técnica de RM ponderada por difusión puede utilizarse como parte de una evaluación integral de la planificación preoperatoria del tratamiento quirúrgico y como un factor pronóstico de la sobrevida global para este grupo de pacientes. Nivel de Evidencia II. Estudio retrospectivo pronóstico.

Impacto de la concentración de suero fetal bovino sobre las células epiteliales dentales / Impacto da concentração de soro bovino fetal nas células epiteliais dentárias / Impact of bovine fetal serum concentration on dental epithelial cells

Resumen El esmalte dental, tejido más duro del cuerpo humano, es formado por medio de la diferenciación de células epiteliales conocidas como ameloblastos. Recientemente, las células epiteliales dentales de incisivo de rata han sido utilizadas como modelo celular de eventos fisiopatológicos durante la formación del esmalte dental. Sin embargo, en función de los eventos estudiados es meritorio comprender su comportamiento, particularmente cuando la concentración del Suero Fetal Bovino (SFB) varia. El propósito de este trabajo es evaluar el impacto de la concentración del SFB sobre el crecimiento, proliferación y supervivencia de las células epiteliales dentales. Células epiteliales dentales fueron cultivadas en DMEM/F12, en presencia y ausencia de SFB. Observaciones morfológicas e inmunohistoquímicos de la actina, vimentina y fibronectina fueron realizados. Los resultados permitieron constatar que la ausencia de SFB afectó negativamente la proliferación de las células epiteliales dentales, pero mantuvo una expresión óptima de la actina y vimentina. Se identificó una alteración en la expresión de la fibronectina en las células tratadas en ausencia de SFB. En conclusión, la carencia de SFB disminuyo drásticamente la supervivencia, proliferación y expresión de la fibronectina en las células epiteliales dentales de rata.

Abstract Dental enamel, the hardest tissue in the human body is formed by the differentiation of epithelial cells known as ameloblasts. Recently rat incisor dental epithelial cells have been used as a cellular model of pathophysiological events during tooth enamel formation. However depending on the events studied, it is necessary to understand the behavior of these cells, particularly when the concentration of Bovine Fetal Serum (FBS) varies. The purpose of this work is to evaluate the impact of FBS concentration on the growth, proliferation, and survival of dental epithelial cells. Dental epithelial cells were cultured in DMEM/F12 culture medium in the absence and presence of 10% FBS. Morphological and immunohistochemical observations of actin, vimentin, and fibronectin were performed. The results confirm that the absence of FBS negatively affected the proliferation of dental epithelial cells but maintained an optimal expression of actin and vimentin. An alteration in the expression of fibronectin in the cells treated in the absence of FBS was identified. In conclusion, the lack of FBS dramatically decreased the survival, proliferation, and expression of fibronectin in rat dental epithelial cells.

RESUMO O esmalte dentário, o tecido mais duro do corpo humano, é formado pela diferenciação de células epiteliais conhecidas como ameloblastos. Recentemente, células epiteliais dentárias de incisivo de rato têm sido utilizadas como modelo celular de eventos fisiopatológicos durante a formação do esmalte dentário. No entanto, dependendo dos eventos estudados, é meritório entender seu comportamento, particularmente quando a concentração de soro fetal bovino (FBS) varia. O objetivo deste trabalho é avaliar o impacto da concentração de SFB no crescimento, proliferação e sobrevivência de células epiteliais dentárias. Células epiteliais dentárias foram cultivadas em DMEM / F12, na presença e ausência de SFB. Observações morfológicas e imunohistoquímicas de actina, vimentina e fibronectina foram realizadas. Os resultados permitiram confirmar que a ausência de SFB afetou negativamente a proliferação de células epiteliais dentárias, mas manteve uma ótima expressão de actina e vimentina. Uma alteração na expressão de fibronectina nas células tratadas na ausência de SFB foi identificada. Em conclusão, a falta de SFB diminuiu drasticamente a sobrevivência, proliferação e expressão de fibronectina em células epiteliais dentárias de ratos

El caseinato de sodio y la caseína α inhiben la proliferación de la línea celular mieloide de ratón 32D clone 3 (32Dcl3) mediante el TNF-α / Sodium caseinate and alfa-casein inhibit proliferation of the mouse myeloid cell line 32D clone 3 (32Dcl3) via TNF-α

Resumen Introducción. Se ha demostrado que el caseinato de sodio y sus componentes (caseínas α, β y κ) inhiben la proliferación de la línea celular hematopoyética de ratón 32D clone 3 (32Dcl3) e inducen su diferenciación hacia macrófagos. Se sabe que la caseína α induce la producción de IL-1β y que esta última citocina inhibe la proliferación celular mediante la producción del factor de necrosis tumoral alfa (TNF-α), pero se desconoce si el caseinato de sodio y las caseínas inducen la producción de TNF y si este es el responsable de la inhibición de la proliferación. Objetivo. Evaluar si el caseinato de sodio y las caseínas α, β y κ inhiben la proliferación de la línea celular 32Dcl3 mediante la producción de TNF-α. Materiales y métodos. Se usaron diferentes concentraciones de caseinato de sodio y de las caseínas α, β y κ en las células 32Dcl3. Posteriormente, se evaluaron la viabilidad celular mediante una prueba con el MTT [3-(4,5-dimetiltiazol-2-ilo)-2,5-difeniltetrazol], la inducción de apoptosis con la citometría de flujo y la síntesis del TNF-α con el ELISA. Además, se hicieron pruebas de neutralización con anti-TNF-α en células 32Dcl3 tratadas con caseinato de sodio y caseína α, y se evaluó la proliferación celular. Resultados. Se encontró que el caseinato de sodio y las caseínas α, β y κ reducían la proliferación de la línea celular 32Dcl3 sin afectar la viabilidad, y que solo el caseinato y la caseína α inducían la apoptosis y la liberación al medio de TNF-α. La proliferación de células 32Dcl3 tratadas con caseinato y caseína α se restableció al usar anticuerpos anti-TNF-α. Conclusión. El TNF-α fue el principal responsable de la inhibición de la proliferación en las células 32Dcl3 tratadas con caseinato de sodio o caseína α.

Abstract Introduction: Sodium caseinate (CS) and its components (alpha-casein, beta-casein, and kappa-casein) have been shown to inhibit the proliferation of the mouse hematopoietic 32D clone 3 (32Dcl3) cell line and induce its differentiation into macrophages. It is well-known that alpha-casein induces IL-1β production and that this cytokine inhibits the proliferation via the production of tumor necrosis factor alpha (TNF-alpha), but it is not known if CS and the caseins inhibit the proliferation via TNF-alpha production. Objective: To evaluate if CS and alpha-casein, beta-casein and kappa-casein inhibit the proliferation on 32Dcl3 cell line via TNF-alpha. Materials and methods: We used different concentrations of CS, alpha-casein, beta-casein and kappa-casein in 32Dcl3 cells to evaluate cell proliferation. We assessed cell viability by MTT, induction to apoptosis by flow cytometry, and TNF-alpha synthesis by ELISA. Additionally, we performed anti-TNF-alpha neutralization assays on 32Dcl3 cells treated with CS and alpha-casein and we evaluated proliferation. Results: The results showed that CS, alpha-casein, beta-casein, and kappa-casein reduced proliferation of the 32Dcl3 cell line without affecting the viability and that only CS and alpha-casein induced apoptosis and the release of TNF-alpha. The 32Dcl3 cells treated with CS and alpha-casein reestablished their proliferation by using anti-TNF-alpha antibodies. Conclusion: TNF-alpha was the main responsible for the inhibition of proliferation in 32Dcl3 cells treated with CS or alpha-casein.

Expresión Inmunohistoquímica de Ki-67 en Lesión Central de Células Gigantes / Immunohistochemical Expression of Ki-67 in Central Giant Cell Lesion

RESUMEN: La lesión central de células gigantes (LCCG) es una lesión osteolítica benigna que en algunos casos presenta un comportamiento agresivo, con recidiva y mal pronóstico. Ki-67 es una proteína nuclear cuya función general es la regulación de la proliferación celular. Este marcador es utilizado para el reconocimiento de células en proliferación y como herramienta de pronóstico en el diagnóstico de neoplasias. El objetivo de este estudio fue cuantificar la inmunoexpresión de Ki-67 en las diferentes poblaciones celulares de las LCCG y analizar su asociación con las características clínicas, demográficas y radiográficas. Se evaluó la inmunoexpresión de Ki-67 de 17 casos de LCCG en dos poblaciones celulares: células gigantes multinucleadas (CGM) y células mesenquimatosas estromales (CME). El análisis estadístico se efectuó con el programa SAS 9.0 y SPSS versión 23.0, con un nivel alfa impuesto de P<0,05. Las CME mostraron inmunoexpresión promedio de 9,4 % y las CGM de 0,65 %. No se encontró relación estadísticamente significativa entre las características clínicas, demográficas y radiográficas de las LCCG y la inmunoexpresión de Ki-67. La expresión de Ki-67 en CME sugiere que esta población se encuentra en constante actividad celular y que las LCCG son lesiones dinámicas y en constante proceso de diferenciación.

ABSTRACT: The central giant cell lesion (CGCL) is a benign osteolytic lesion which in some cases presents an aggressive behavior with recurrence and poor prognosis. Ki67 is a nuclear protein whose general function is the regulation of cell proliferation. This marker is used to identify proliferating cells and as a prognostic tool in the diagnosis of neoplasms. The aim of this study was to quantify the immune expression of Ki-67 in the different cell populations of CGCL and analyze its association with clinical, demographic and radiographic characteristics. The Ki-67 immune expression of 17 cases of LCCG was evaluated in two cell populations: multinucleated giant cells (CGM) and stromal mesenchymal cells (SMC). The statistical analysis was carried out with SAS 9.0 and SPSS version 23.0, with an alpha tax level of P <0.05. The CME showed average immune expression of 9.4 % and the CGM of 0.65 %. No statistically significant relationship was found between the clinical, demographic and radiographic characteristics of the CGCL and the immune expression of Ki-67. The expression of Ki-67 in CME suggests that this population is in constant cellular activity, and that the CGCL are dynamic lesions in a continuous differentiation process.

Angiogenesis and tumor progression inhibition of cyclooxygenase-2 selective inhibitor celecoxib associated with poly (lactic-co-glycolic acid) in tumor cell line resistant to chemotherapy / Inhibición de angiogénesis y progresión tumoral por inhibidor selectivo de ciclooxigenasa-2 celecoxib asociado con ácido (poli láctico co-glicólico) en línea de células tumorales resistentes a quimioterapia

Although, antineoplastic therapies have now been developed reduction of tumor progression,itis necessarytofind new therapeutic alternatives to suppress angiogenesis.Thus celecoxib (Cx) has been used for its antiangiogenic action in combination with certain polymeric compounds such as poly (lactic co-glycolic acid) (PLGA) acid, which help to improve the bioavailability and avoid effects of long drug administrations. For this purpose we used a murine tumor modelinduced by mammary adenocarcinoma cells resistant to chemotherapy (TA3-MTXR). CX/PLGA inhibits the microvascular density, VEGF expression and cell proliferationinaddition to increased apoptosis (P <0.0001). Cx reduces tumor progression in a concentration of 1000 ppm associated with PLGA, reducing cell proliferation, the presence of VEGF and promoting apoptosis of multiresistant TA3 tumor cells.

Si bien actualmente se han desarrollado terapias antineoplásicas que permiten reducir de cierta manera el avance tumoral, es necesario buscar nuevas alternativas terapéuticas que permitan suprimir la angiogénesis. Es así como el Celecoxib (Cx) ha sido utilizado por su acción antiangiogénica en combinación con algunos compuestos poliméricos, tal como el ácido poli (láctico co-glicólico) (PLGA), el cual ayudaría a mejorar la biodisponibilidad y evitaría efectos derivados de largas administraciones del fármaco. Para tal efecto se ha utilizado un modelo tumoral murino, inducido por células tumorales de adenocarcinoma mamario resistente a la quimioterapia (TA3-MTXR). Los resultados indican que CX/PLGA inhibe la microvascularización, expresión de VEGF y la proliferación celular además del aumento de la apoptosis (P<0,0001). El efecto antitumoral del Cx está bien reportado en la literatura; este sumado a la microencapsulación con PLGA, aportarían un sistema de administración útil, ya que nos otorga una administración sostenida en el tiempo, los cual podría ayudar a mantener los niveles de droga durante un período más prolongado, lo cual sería beneficioso en la terapia tumoral.

Histological markers of degeneration and regeneration of the human intervertebral disk / Marcadores histológicos de degeneração e regeneração do disco intervertebral humano / Marcadores histológicos de la degeneración y regeneración del disco intervertebral humano

ABSTRACT Objective: To define histological scores for intervertebral disc degeneration that would enable the definition of morphological characteristics of disease, besides improving knowledge of the lumbar degenerative disc disease by means of immunohistochemical markers. Methods: Hematoxylin and Eosin, Alcian/PAS, Masson Trichrome and Safranin O/FCF staining was used on the intervertebral disc degeneration sections of patients with lumbar degenerative disc disease. The protein markers defined in immunohistochemistry were cell proliferation (Ki-67) and apoptosis (p53). Results: The study data enabled the determination of Safranin O/FCF stain as the most effective one for evaluating parameters such as area, diameter, and number of chondrocyte clusters. The importance of using stains in association, such as Safranin O/FCF, Masson Trichrome, Alcian/PAS and Hematoxylin and Eosin, was also determined, as they are complementary for the histopathological verification of intervertebral disc degeneration. By expressing proteins using the immunohistochemistry technique, it was possible to consider two stages of disc degeneration: cell proliferation with chondrocyte cluster formation, and induction of apoptosis. Conclusion: This study enabled the histological and immunohistochemical characterization to be determined for lumbar degenerative disc disease, and its degrees of evolution, by determining new disc degeneration scores.

RESUMO Objetivo: Definir escores histológicos de degeneração do disco intervertebral que permitam a identificação de características morfológicas da doença, além de melhorar o conhecimento sobre a discopatia degenerativa lombar por meio de marcadores imuno-histoquímicos. Métodos: As colorações histológicas de hematoxilina e eosina, azul de alcian/PAS, tricrômica de Masson e safranina O/FCF foram utilizadas em cortes de disco intervertebral degenerado de pacientes com discopatia degenerativa lombar. Os marcadores proteicos definidos na imuno-histoquímica permitiram a avaliação da proliferação celular (Ki-67) e da apoptose (p53). Resultados: Os dados do estudo permitiram a determinação da coloração de safranina O/FCF como a mais eficaz para avaliar os parâmetros tais como a área, o diâmetro e o número de agrupamentos de condrócitos. Também se determinou a importância do uso das colorações histológicas de forma associada, como safranina O/FCF, tricrômica de Masson, azul de alcian/PAS e hematoxilina e eosina, uma vez que elas são complementares para a verificação histopatológica da degeneração do disco intervertebral. Pela técnica da expressão de proteínas com técnica imuno-histoquímica, foi possível considerar dois estágios de degeneração do disco: proliferação de células com a formação de agrupamentos de condrócitos, seguida pela indução de apoptose. Conclusão: Este estudo permitiu definir a caracterização histológica e imuno-histoquímica em discopatia degenerativa lombar e seus graus de evolução, determinando novos escores de degeneração discal.

RESUMEN Objetivo: Definir valores histológicos de degeneración del disco intervertebral que permitan la definición de las características morfológicas de la enfermedad y mejorar el conocimiento de la enfermedad degenerativa del disco lumbar mediante marcadores inmunohistoquímicos. Métodos: Las coloraciones histológicas con hematoxilina y eosina, azul alcián/PAS, tricrómico de Masson y safranina O/FCF se utilizaron en secciones de los discos intervertebrales degenerados de pacientes con enfermedad degenerativa del disco lumbar. Los marcadores de proteínas definidos por inmunohistoquímica permitieron la evaluación de la proliferación celular (Ki-67), y la apoptosis (p53) . Resultados: Los datos de la determinación permitieron establecer la tinción con safranina O/FCF como la más eficaz para evaluar parámetros tales como el área, diámetro y número de agrupaciones de condrocitos. Se determinó también la importancia del uso asociado de diversas tinciones, como safranina O/FCF, tricrómico de Masson, azul de alcián/PAS y hematoxilina y eosina, ya que son complementarias para la verificación histopatológica de la degeneración del disco intervertebral. Por la técnica de la expresión de proteína con análisis inmunohistoquímica, fue posible establecer dos etapas de la degeneración del disco: la proliferación de células con la formación de agrupaciones de condrocitos y la inducción de la apoptosis. Conclusión: Este estudio permitió definir la caracterización histológica e inmunohistoquímica en la enfermedad degenerativa del disco lumbar y sus grados de evolución, mediante la determinación de nuevas puntuaciones de degeneración del disco.

Sirolimus on Gorham-Stout disease. Case report / Sirolimus en la enfermedad de Gorham-Stout. Caso clínico

Abstract Background: Gorham-Stout disease (GSD) is a rare disease of unknown etiology characterized by vascular proliferation that produces destruction of bone matrix. Case description: This case is about 43 year old woman who begins with pain in sternum, dyspnea, abdominal mass and, serous-hematic pleural effusion. Imaging tests were performed showing lesions on 6th and 10th left ribs archs. Later, a thoracotomy was performed observed absence of the end of the 6th and lung, pleural and costal biopsy was token. The histologic features described lymphatic vascular proliferation in bone tissue of chest wall. Other pathologies were excluded and in view of the findings, GSD diagnosis was made. Treatment and outcome: treatment was initiated with sirolimus achieving remission of the disease after the first month; however, because the presence of metrorrhagia the treatment was discontinued, reappearing symptoms afterwards. For that reason the treatment was restarted getting disappearance of the symptoms again, 4 weeks later. Clinical relevance: we present the first clinical cases of EGS with pleural effusion with response to sirolimus treatment that could be an alternative to the current therapy.

Resumen Antecedentes: La enfermedad de Gorham-Stout (EGS), es una enfermedad poco común, de etiología desconocida, caracterizada por la proliferación vascular que produce destrucción de la matriz ósea. Caso clínico: Se presenta el caso de mujer de 43 años que comienza con dolor en el esternón, disnea y tumoración abdominal junto con derrame pleural izquierdo de características serohemáticas como forma de presentación de una EGS. En pruebas de imagen que mostraron lesiones líticas en el 6º y 10º arcos costales izquierdos. Posteriormente se realizó toracotomía con biopsia pulmonar, pleural y costal observándose ausencia del extremo de la 6ª costilla. En el estudio histopatológico se describe proliferación vascular linfática en tejido óseo de pared costal. Se excluyeron otras patologías y se diagnosticó EGS. Tratamiento y resultado: Se inició tratamiento con sirolimus consiguiendo remisión completa desde el primer mes. Sin embargo, tras la suspensión del tratamiento por metrorragias, presentó reaparición de los síntomas. Se decide entonces reiniciar el tratamiento, consiguiendo nuevamente desaparición de los síntomas, tras 4 semanas de tratamiento. Relevancia clínica: Se presenta el primer caso clínico de EGS en edad adulta con derrame pleural asociado y con respuesta clínica a sirolimus, fármaco que podría ser una alternativa a la terapéutica actual.

Effects of polymeric zinc propylen-bis-dithiocarbamate (propineb) on nasal mucosa in rats / Efectos de los polímeros del zinc propileno-bis-ditiocarbamato (propineb) en la mucosa nasal de ratas

The objective of this study was to evaluate the histopathologic and immunohistochemical effects of propineb on rat nasal mucosa. Twenty adult Sprague-Dawley rats weighing 180­220 g, were used as experimental animals. The rats were divided into propineb and control groups. The control group received distilled water with spray at the same time period. The experiment was terminated after three weeks. In each case, sections of the nosewere taken. In experimental group, microscopic examination of nasal respiratory mucosa revealed that degenerative changes in epithelium were observed in sections of propineb-treated group. There were also leukocyte infiltration and vascular dilatation detected in the connective tissue.We detected CD34-immunoreactive mononuclear cells and endothel cells in the lamina propria of propineb group. In propineb group compared to the control group, the respiratory epithelium, goblet and basal cell nuclei were stained positive for PCNA. Propineb inhalation may be irritating to the nasal mucosa.

El objetivo de este estudio fue evaluar los efecto histopatológicos e inmunohistoquímicos del Propineb en la mucosa nasal de 20 ratas Sprague-Dawley adultas con un peso de 180-220 g, las que fueron utilizadas como animales de experimentación. Las ratas se dividieron en grupos Propineb y Control. El grupo control recibió agua destilada en aerosol nasal en el mismo período de tiempo que el grupo Propineb. El experimento duró tres semanas. Posteriormente, en cada caso se tomaron muestras de la mucosa nasal. En el grupo experimental, tratado con Propineb, el examen microscópico de la mucosa respiratoria nasal reveló cambios degenerativos en el epitelio. Se detectó también infiltración de leucocitos y dilatación vascular en el tejido conectivo, junto con células mononucleares CD34 inmunorreactiva y células endoteliales en la lámina propia. En el grupo Propineb, en comparación con el grupo control, los núcleos de la porción respiratoria, las células caliciformes y basales resultaron positivas a la tinción del antígeno nuclear de proliferación celular (PCNA). La inhalación de Propineb puede ser un irritante para la mucosa nasal.

Effects of Potentilla Fulgens as Prophylactic Agent in Intestinal Ischemia Reperfusion Injury / Efectos de Potentilla fulgens como Agente Profiláctico en la Lesión por Isquemia-Reperfusión Intestinal

The purpose of this study, ischemia reperfusion injury in rats, Potentilla fulgens is to investigate the protective effects. Wistar albino rats (n= 30) weighing 180-220 g were used in the experiment. Group 1 animals underwent sham laparotomy without ischemia-reperfusion injury. Group 2 animals underwent laparotomy and occlusion of superior mesenteric arteries for 30 min followed by 20 min of reperfusion without pretreatment. The Potentilla fulgens group received 400 mg/kg/day Potentilla fulgens intraperitoneally 5 days before Ischemia-reperfusion injury. There was a significant difference between the group with ischemia-reperfusion group Potentilla fulgens (p<0.0001). In statistical analysis of the MDA level, data were obtained after a respective measurement in all groups. Potentilla fulgens group with ischemia-reperfusion group was a significant decrease in MDA (p<0.001). In the period after ischemia-reperfusion, marked PCNA immunoreactivities were observed in the nuclei of crypt and villus cell. In ischemia reperfusion group, the number of PCNA immunoreactivity is quite advanced and they extended throughout the middle part of the intestine folds. The number of TUNEL-positive nuclei were also developed. In ischemia-reperfusion plus P. fulgens group, the intestinal epithelium with only a few PCNA immunoreactive nuclei. TUNEL positive nuclei were noted in the gut lumen and mucosal close differentiated goblet cells. We showed that Potentilla fulgens extract significantly prevented mucosal lesions caused by intestinal ischemia-reperfusion.

El objetivo fue investigar los efectos protectores de Potentilla fulgens sobre la lesión por isquemia-reperfusión en ratas albinas Wistar (n= 30) con un peso de 180 g. En el grupo 1, los animales fueron sometidos a laparotomía simulada sin lesión por isquemia-reperfusión. En el Grupo 2, los animales fueron sometidos a laparotomía y oclusión de las arteria mesentérica superior durante 30 min seguido de 20 min de reperfusión sin pretratamiento. El grupo Potentilla fulgens recibió 400 mg/kg/día de P. fulgens por vía intraperitoneal 5 días antes de la lesión por isquemia-reperfusión. Hubo diferencias significativas entre el grupo de grupo con isquemia-reperfusión y el tratado con Potentilla fulgens (p<0,0001). En el análisis estadístico del nivel de malondialdehído (MDA), los datos se obtuvieron después de una medición respectiva en todos los grupos. Los grupos Potentilla fulgens y con isquemia-reperfusión tuvieron una disminución significativade MDA (p<0,0001). En el periodo después de la isquemia-reperfusión, se observó inmunorreactividad del marcador PCNA en los núcleos de las células de las criptas y vellosidades. En el grupo de isquemia-reperfusión, la inmunoreactividad a PCNA fue bastante avanzada y se extendió a lo largo de la parte media de los plieges intestinales. También aumentó el número de núcleos positivos a TUNEL. En el grupo isquemia-reperfusión tratado con P. fulgens, el epitelio intestinal mostró pocos núcleos inmunorreactivos a PCNA; núcleos positivos a TUNEL se observaron en el lumen intestinal y la mucosa, cerca de las células caliciformes diferenciadas. Demostramos que el extracto de P. fulgens disminuye significativamente lesiones de la mucosa intestinal causadas por la isquemia-reperfusión.

Papel de la leptina en la fisiología y fisiopatología oral / Leptin’s role in oral physiology and physiopathology

Hace 20 años se caracterizó por primera vez a la leptina, como un péptido anorexigénico que actúa a nivel del hipotálamo y desde entonces se le ha descrito un papel clave en el funcionamiento de una gran diversidad de tejidos, siendo la boca un sitio blanco para muchas funciones mediadas por este péptido, tales como la inducción del crecimiento y diferenciación de diversos tejidos dentales y periodontales, la modulación de la percepción del sabor dulce en las papilas gustativas, la regulación de la deglución y la activación de la respuesta inmunológica. Por otra parte, la leptina juega un papel importante en la mediación de la respuesta ante diferentes agentes agresores en la boca, como las bacterias periodontopatógenas y el alcohol, además participa en ciertos tipos de cáncer en esta cavidad. Este resumen pretende dar una visión general de los diferentes roles que cumple la leptina a nivel bucal descritos hasta la fecha, comenzando por su función en la boca sana, hasta llegar a su participación en la fisiopatología bucal.

Leptin was characterized for the first time 20 years ago as an anorexigenic peptide that acts on the hypothalamus and has since been described as having a key role in the functioning of a great number of tissues. The mouth is one of the areas of the body where this peptide influences processes, such as growth induction and differentiation of various dental and periodontal tissues, modulation of sweet tastes’ perception in the taste buds, swallowing regulation and immune response activation. Moreover, leptin also plays an important role in mediating the response to different oral aggressors, such as periodontopathic bacteria and alcohol, as well as its involvement in certain types of mouth cancer. This review aims to provide an overview of leptin’s known roles on the oral cavity to date, ranging from its function in a healthy mouth to its involvement in oral physiopathology.